產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱(chēng):C166小鼠血管內皮細胞

  • 產(chǎn)品型號:1×10?cells/T63培養瓶
  • 產(chǎn)品廠(chǎng)商:通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格:890
  • 產(chǎn)品庫存:100
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
C166小鼠血管內皮細胞吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒(méi)細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;(細胞對于消化比較敏感,消化過(guò)度會(huì )嚴重影響細胞狀態(tài),導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(cháng)。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時(shí)即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮?;靹蚣毎麜r(shí)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
詳情介紹:
Catalogue No :  C1177
Product Format :  a T25 flask
Culture Properties : 貼壁
Complete Growth Medium :  89%H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
Atmosphere :  air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application :  Cells and cancer research
NOTE :  FOR RESEARCH USE ONLY
Operation steps for cell culture
1. 吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養瓶潤洗細胞。
2. 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒(méi)細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;(細胞對于消化比較敏感,消化過(guò)度會(huì )嚴重影響細胞狀態(tài),導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(cháng)。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時(shí)即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮?;靹蚣毎麜r(shí)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3. 加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻。 
4. 將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養。
傳代比例 : 不同細胞生長(cháng)速度不一,具體傳代比例視細胞生長(cháng)速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長(cháng)較慢的細胞可以1:2傳代。
Cell cryopreservation
1. 凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實(shí)驗室條件自行選擇)
2. 降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過(guò)夜后液氮保存。
Tips
1. 細胞經(jīng)過(guò)運輸后,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F象。貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900-1000rpm(約150g)離心3min,棄上清。加5ml PBS重懸細胞,再900-1000rpm(約150g)離心3min,用新鮮的完全培養基重懸接種到新的培養瓶。二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時(shí)碎片比較少,傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。
2. 細胞生長(cháng)不均時(shí),可以將細胞消化吹散后加入新的培養基重新接種或傳代。
3. 細胞生長(cháng)緩慢時(shí),可以選擇提高血清濃度培養(不超過(guò)20%),也可以根據細胞生長(cháng)狀態(tài),選擇傳代細胞到新的培養瓶中繼續培養。
4. 不同細胞貼壁性差異比較大,所以消化時(shí)間差別較大,20s-10min均有可能,具體以細胞消化到相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準,嚴禁消化到細胞完全漂浮??蛻?hù)消化過(guò)度導致細胞死亡、漂浮、生長(cháng)緩慢,不提供免費售后服務(wù)。
5. 干冰發(fā)貨均為兩支,客戶(hù)先復蘇一支,若復蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導下復蘇二支。若客戶(hù)同時(shí)復蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方不提供免費售后服務(wù)。
6. 細胞狀態(tài)正常時(shí),應盡快凍存細胞保種,凍存后應隨機抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶(hù)凍存細胞導致死亡負責,客戶(hù)凍存細胞死亡不提供免費售后服務(wù)。
客戶(hù)收到細胞有任何疑問(wèn)請及時(shí)致電我們,細胞收到后1周內沒(méi)有任何電話(huà),或其他形式回訪(fǎng),默認為細胞質(zhì)量沒(méi)問(wèn)題,之后出了任何問(wèn)題不給予免費售后。細胞免費售后只提供一次,若重發(fā)后再次培養死亡不再免費補發(fā),細胞收貨時(shí)已經(jīng)死亡或密度不足的除外。
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